Immune challenges upregulate the expression of cannabinoid receptors in cultured human odontoblasts and gingival fibroblasts / Los desafíos inmunológicos regulan la expresión de los receptores cannabinoides en cultivos de odontoblastos y fibroblastos gingivales humanos

ABSTRACT Odontoblasts and gingival fibroblasts play essential roles in the physiological and pathological processes of dental tissue. Cannabinoid receptors (CB1 and CB2) are involved in analgesia by modulating the función of calcium channels that inhibit the synthesis of some neurotransmitters. A better understanding of the physiology of these receptors would provide the possibility of using them as therapeutic targets in controlling dental pain. The aim of this study was to evaluate the presence and activity of cannabinoid receptors in human odontoblast-like cells (OLC) and human gingival fibroblasts (HGF). CB1 and CB2 transcription was analyzed by real-time PCR, proteins were detected by immunofluorescence, and functional cannabinoid receptors were evaluated by measuring intracellular calcium concentration after stimulation with cannabidiol (CBD) and pre-treatment with a CB1 antagonist, a CB2 inverse agonist and a TRPV1 antagonist. Transcripts for CB1 and CB2 were found in both odontoblasts and gingival fibroblasts. Cannabidiol induced an increase in [Ca2+]i in both cells types, but surprisingly, pre-treatment with selective cannabinoid antagonists attenuated this effect, suggesting a functional communication between specific cannabinoid receptors and other CBD target receptors. In conclusion, human odontoblasts and gingival fibroblasts express functional CB1 and CB2 cannabinoid receptors, which could be modulated to improve the treatment of pain or dental sensitivity.

RESUMEN Los odontoblastos y los fibroblastos gingivales desempeñan funciones esenciales en los procesos fisiológicos y patológicos de los tejidos dentales. Los receptores cannabinoides (CB1 y CB2) participan en la analgesia mediante la modulación de la función de canales de calcio que inhiben la síntesis de algunos neurotransmisores. Un mejor conocimiento de su fisiología abre la posibilidad de utilizar estos receptores como dianas terapéuticas en el control del dolor dental. Este trabajo tuvo como objetivo evaluar la presencia y la actividad de los receptores cannabinoides en células humanas similares a los odontoblastos (OLC) y en fibroblastos gingivales humanos (HGF). Se analizó la transcripción de CB1 y CB2 por PCR en tiempo real, la detección de las proteínas por inmunofluorescencia y se evaluaron los receptores cannabinoides funcionales midiendo las concentraciones de calcio intracelular, tras la estimulación con cannabidiol (CBD) y el pretratamiento con un antagonista de CB1, un agonista inverso de CB2 y un antagonista de TRPV1. Se encontraron mensajeros para CB1 y CB2 tanto en odontoblastos como en fibroblastos gingivales. El cannabidiol indujo un aumento de la [Ca2+]i en ambos tipos de células, pero sorprendentemente el pretratamiento con antagonistas cannabinoides selectivos atenuó este efecto, lo que sugiere una comunicación funcional entre receptores cannabinoides específicos y otros receptores diana del CBD. En conclusión, los odontoblastos humanos y los fibroblastos gingivales expresan receptores cannabinoides CB1 y CB2 funcionales, que podrían ser modulados para mejorar el tratamiento del dolor o la sensibilidad dental.

Caries radicular: actualización sobre una patología de creciente interés

La caries radicular es un proceso dinámico de destrucción localizada de las superficies radiculares, dependiente de biopelícula. Esta patología afecta principalmente a la población adulta mayor con superficies radiculares expuestas y altera su calidad de vida. Las vulnerabilidades y multimorbilidades, frecuentes en este grupo de edad, limitan el autocuidado oral y son criterios para considerar en la comprensión y manejo de la patología. El diagnóstico de las lesiones de caries radicular implica conocimiento de la estructura radicular sana, los factores indicadores o de riesgo, los mecanismos de desarrollo de las lesiones y los criterios para su detección y valoración. La elección correcta de opciones de manejo tanto del riesgo como de las lesiones de caries, enfocada en la preservación de la estructura, evidencia la comprensión de la caries radicular. La caries radicular plantea un desafío para la academia, los sistemas de salud, la práctica clínica dental y la población, debido a que sus indicadores están aumentando en relación con el envejecimiento poblacional y la mayor conservación de dientes naturales. El propósito de esta revisión de tema fue presentar el estado del entendimiento actual de caries radicular. Se incluyeron 81 artículos publicados entre 1971 y 2021, sobre embriogénesis de la raíz; prevalencia, etiopatogenia; características de las lesiones; diagnóstico y propuestas de manejo a nivel del riesgo individual y de las lesiones. Esta actualización es pertinente por el reto que conlleva la presencia cada vez mayor de esta patología, junto con sus consecuencias. El planteamiento de su estado del arte sugiere áreas de investigación.

Root caries is a dynamic process of localized destruction of the root surfaces, dependent on the biofilm. Its pathology mainly affects the elderly toothed population with exposed root surfaces and disrupts their quality of life. Vulnerabilities and multimorbidities, frequent in this age group, limit oral self-care and are criteria to be considered in understanding and managing the disease. The root caries lesions diagnosis implies knowledge about the healthy root structure, indicators or risk factors, caries lesions development mechanism, and the detection and assessment criteria. The correct selection of caries risk and management options preserving tooth structure shows the understanding of root caries. The root caries represents a challenge for academia, health systems, dental practice, and the population because its indicators are increasing related to aging population and greater conservation of natural teeth. This review aimed to present the state of the current understanding of root caries. Eighty-one papers published between 1971 and 2021 were included. This considered root embryogenesis; the current understanding of root caries, its prevalence and etiopathogenesis; characteristics of the lesions; diagnosis, and care proposals both at the individual risk level, and at the lesions level. This update is relevant due to the risk that the increasing presence of this pathology carries, together with its consequences. The statement of its state of the art suggests areas of research.

The mouth, oral health, and infection with SARS-CoV-2: An underestimated topic / La boca, la salud oral y la infección con SARS.CoV-2: Un tema desestimado

Abstract With the present review, we propose recognizing and analyzing some fundamental aspects recently reported in the literature, which relate the oral cavity to SARS CoV-2 infection. A literature search was performed in Pubmed, Scopus, Scielo and the medRivx preprint server. There, articles published during 2019 and 2020 were selected from research associated with oral cavity, COVID 19, SARS-CoV-2, viral diagnosis in saliva and the use of mouth rinses as a possible mechanism to reduce viral load. A total of 33 articles related to oral cavity; SARS-CoV-2 infection; oral manifestations of COVID 19; symptomatology, saliva diagnosis, and the use of mouth rinses to minimize the risk of infection were selected. The oral manifestations of COVID 19 were recognized among the findings; also, the potential of the oral cavity as a site of infection and viral dissemination to other organs was evidenced and the role of saliva as a diagnostic tool for SARS-CoV-2. Knowledge about the oral cavity and the relationship with SARS-CoV-2 is limited, making necessary a better understanding the oral manifestations during CO VID-19, symptoms and possible complications in the mouth. The need for the establishment of infection prevention strategies during dental practice is identified.

Resumen La presente revisión se propuso reconocer y analizar algunos aspectos fundamentales reportados recientemente en la literatura, que relacionan la cavidad bucal con la infección por SARS-CoV-2. Se realizó una búsqueda bibliográfica en Pubmed, Scopus, Scielo y el servidor de preimpresión medRivx. Posteriormente, los artículos publicados durante 2019 y 2020 fueron seleccionados de una búsqueda asociada a la cavidad oral, COVID 19, SARS-CoV-2, diagnóstico viral en saliva y uso de enjuagues bucales como posible mecanismo para reducir la carga viral. Se seleccionó un total de 33 artículos relacionados con la cavidad bucal; infección por SARS-CoV-2; manifestaciones orales de COVID 19; sintomatología, diagnós tico en saliva y uso de enjuagues bucales para minimizar el riesgo de infección. Las manifestaciones orales de COVID 19 fueron reconocidas entre los hallazgos; además, se evidenció el potencial de la cavidad bucal como sitio de infección y diseminación viral a otros órganos y el papel de la saliva como herramienta de diagnóstico para el SARS-CoV-2. El conocimiento sobre la cavidad bucal y la relación con el SARS-CoV-2 es limitado, por lo que es necesario profundizar en las manifestaciones bucales durante la CO VID-19, síntomas y posibles complicaciones en la boca. Se identificó la necesidad de establecer estrategias de prevención de la infección durante la práctica odontológica.

Reconociendo el virus del chikunguña / Rediscovering the chikungunya virus

Resumen | El virus de chikunguña (CHIKV) es un Alfavirus perteneciente al grupo denominado del Viejo Mundo; estos son virus artritogénicos que causan una enfermedad febril caracterizada por artralgias y mialgias. Aunque la muerte por CHIKV es poco frecuente, la enfermedad puede llegar a ser incapacitante y generar un amplio espectro de manifestaciones atípicas, como complicaciones cardiovasculares, respiratorias, oculares, renales y dérmicas, entre otras. Cuando el dolor articular persiste por tres o más meses, da lugar a la forma crónica de la enfermedad denominada reumatismo inflamatorio crónico poschikunguña, el cual es la principal secuela de la enfermedad. Se considera que este virus no es neurotrópico, sin embargo, puede afectar el sistema nervioso central y generar secuelas graves y permanentes, principalmente, en niños y ancianos. En África, Asia y Europa se habían reportado anteriormente brotes epidémicos por CHIKV, pero solo hasta finales del 2013 se documentó la introducción del virus a las Américas; desde entonces, el virus se ha propagado a 45 países o territorios del continente y el número de casos acumulados ascendió a cerca de dos millones en dos años. Esta revisión describe de manera general la biología molecular del virus, sus manifestaciones clínicas, su patogénesis y las principales complicaciones posteriores a la infección. Además, reúne la información de la epidemia en Colombia y el continente americano publicada entre el 2014 y el 2020.

Abstract | The chikungunya virus (CHIKV) is an Alphavirus that belongs to the Old World group. These arthritogenic viruses cause a febrile illness characterized by arthralgias and myalgias. Although fatal cases during CHIKV infection are rare, the disease may be disabling and generate a broad spectrum of atypical manifestations, such as cardiovascular, respiratory, eye, kidney, and skin complications, among others. When joint pain persists for three or more months, it results in the chronic form of the disease called post-chikungunya chronic inflammatory rheumatism, which constitutes the main disease sequel. CHIKV is not considered a neurotropic virus; however, it can affect the central nervous system, especially in children and the elderly, causing severe and permanent sequelae. CHIKV outbreaks had been previously reported in Africa, Asia, and Europe, but the virus introduction to the American continent was documented until the end of 2013. Since then, the virus has spread to 45 countries and territories causing near two million cases in just two years. This review describes the molecular biology, clinical manifestations, pathogenesis, and significant post-infection complications of CHIKV. Additionally, it collects published information about the outbreak in Colombia and the American continent between 2014 and 2020.

Consenso de grupo Ad-hoc sobre recomendaciones para la evaluación y controles de calidad para el diagnóstico molecular y serológico de la infección humana por SARS CoV-2 / Ad-hoc group consensus recommendations on the evaluation and quality control of molecular and serological diagnostics tests for SARS CoV-2 human infection

Se formulan recomendaciones de un grupo de consenso de expertos sobre los criterios para evaluar el desempeño diagnóstico (tamaño y selección de muestras para sensibilidad y especificidad analíticas, criterios para establecer límites de detección, criterios para establecer el estándar de oro para las serologías) que deberían ser tenidos en cuenta al evaluar y validar las pruebas diagnósticas para SARS CoV-2. Con el propósito de asegurar la calidad de las pruebas serológicas a utilizar en el país, se recomienda la participación en un programa de control de calidad externo, que garantice la idoneidad y desempeño en la realización de las pruebas diagnósticas serológicas y moleculares durante esta pandemia, ya que su uso tiene profundas implicaciones para las medidas de intervención clínicas individuales y de seguimiento y control en salud pública.

We formulate recommendations from a consensus working group on the criteria to evaluate the diagnostic performance (size and criteria of selection of samples to determine sensitivity, analytical specificity, criteria for limit of detection, criteria for gold standard to evaluate serological assays) that should be taken into account during the evaluation and validation/verification of diagnostic tests for SARS CoV-2 infection. A national external quality control program should be established to guarantee the suitability and performance of these diagnostic serological and molecular tests during this pandemic, that will have deep implications for decisions on clinical and public health.

Differential replicative fitness of the four dengue virus serotypes circulating in Colombia in human liver Huh7 cells

ABSTRACT Dengue has been a significant public health problem in Colombia since the simultaneous circulation of the four dengue virus serotypes. The replicative fitness of dengue is a biological feature important for virus evolution and contributes to elucidating the behavior of virus populations and viral pathogenesis. However, it has not yet been studied in Colombian isolates. This study aimed to compare the replicative fitness of the four dengue virus serotypes and understand the association between the serotypes, their in vitro infection ability, and their replication in target cells. We used three isolates of each DENV serotype to infect Huh-7 cells at an MOI of 0.5. The percentage of infected cells was evaluated by flow cytometry, cell viability was evaluated by MTT assay, and the pathogenicity index was calculated as a ratio of both parameters. The replicative fitness was measured by the number of viral genome copies produced using quantitative PCR and the production of infectious viral progeny was measured by plaque assay. We showed that Huh-7 cells were susceptible to infection with all the different strain isolates. Nevertheless, the biological characteristics, such as infectious ability and cell viability, were strain-dependent. We also found different degrees of pathogenicity between strains of the four serotypes, representative of the heterogeneity displayed in the circulating population. When we analyzed the replicative fitness using the mean values obtained from RT-qPCR and plaque assay for the different strains, we found serotype-dependent behavior. The highest mean values of replicative fitness were obtained for DENV-1 (log 4.9 PFU/ml) and DENV-4 (log 5.28 PFU/ml), followed by DENV-2 (log 3.9 PFU/ml) and DENV-3 (log 4.31 PFU/ml). The internal heterogeneity of the replicative fitness within each serotype could explain the simultaneous circulation of the four DENV serotypes in Colombia.

Anticuerpos policlonales contra la proteína recombinante NS3 del virus del dengue / Polyclonal antibodies against recombinant dengue virus NS3 protein

Resumen Introducción: El dengue es una enfermedad causada por uno de los cuatro serotipos del virus del dengue (DENV) y es endémica en, aproximadamente, 130 países. Su incidencia ha aumentado notablemente en las últimas décadas, así como la frecuencia y la magnitud de los brotes. A pesar de los esfuerzos, no existen tratamientos profilácticos ni terapéuticos contra la enfermedad y, en ese contexto, el estudio de los procesos que gobiernan el ciclo de infección del DENV es esencial para desarrollar vacunas o terapias antivirales. Una de las moléculas del DENV más prometedoras es la proteína no estructural 3 (NS3), la cual es indispensable para la replicación viral y es uno de los principales blancos inmunológicos durante la infección. Objetivo: Producir anticuerpos policlonales para contribuir a los futuros estudios sobre las interacciones entre la proteína NS3 y otras proteínas celulares. Materiales y métodos: Se expresaron dos proteínas recombinantes del dominio helicasa de NS3 del DENV de serotipo 2, las cuales se emplearon para inmunizar ratas y producir anticuerpos policlonales. Resultados: Los anticuerpos producidos fueron útiles en ensayos de Western blot e inmunofluorescencia y se reportó por primera vez un anticuerpo policlonal anti-NS3 que permitió la inmunoprecipitación de la proteína viral y la detecta con Western blot sin necesidad de inducir sobreexpresión de NS3 o de usar extractos de células marcados metabólicamente con radioisótopos. Conclusión: Las proteínas recombinantes expresadas y los anticuerpos producidos constituyen herramientas valiosas para estudiar procesos infecciosos del DENV que involucren a la proteína NS3 y evaluar pruebas dirigidas a interferir las funciones de esta proteína.

Abstract Introduction: Dengue is a disease caused by one of four serotypes of the dengue virus (DENV) and is endemic in approximately 130 countries. The incidence of dengue has increased dramatically in recent decades, as well as the frequency and magnitude of outbreaks. Despite all efforts, there are no prophylactic or therapeutic treatments for the disease. Accordingly, research on the processes governing the DENV infection cycle is essential to develop vaccines or antiviral therapies. One of the most attractive DENV molecules to investigate is nonstructural protein 3 (NS3), which is essential for viral replication and a major immune target for infection. Objective: To produce antibodies to support future studies on NS3 and its cellular interactions with other proteins. Materials and methods: Two recombinant proteins of the helicase domain of DENV NS3 serotype 2 were expressed, and used to immunize mice and produce polyclonal antibodies. Results: The antibodies produced were useful in Western blot and immunofluorescence tests. We report an NS3 antibody that immunoprecipitates the viral protein and detects it in Western blot with no need to over-express it or use cell extracts with metabolic radiolabeling.

Description of an in vivo oral mucosa HSV-1 infection model in mice

In this work, we established an in vivo murine model of herpes simplex virus type 1 (HSV1) infection involving inoculation by scarification of the oral mucosain order to study its dissemination towards the trigeminal ganglion (TG). Both viral DNA and infectious virions were detected on the third day postinfection (p.i.). Viral proteins revealed by immunohistochemistry were mainly found at seven days p.i., when the latencyassociated transcript (LAT) was also detected. This model simulated the dissemination process of HSV1, which could be used to study herpes pathogenesis starting in the oral mucosa (AU)

Con el propósito de estudiar la dispersión de del Herpes Simplex Virus tipo 1 (HSV1) desde la mucosa oral hasta los ganglios trigeminales, en el presente trabajo se estableció un modelo de infección en ratones, haciendo inoculación por escarificación en la mucosa oral. Tanto ADN viral como viriones infecciosos se detectaron en los ganglios trigeminales al dia 3 postinfección (p.i.). Las proteínas virales se detectaron principalmente al día 7 p.i. cuando los transcritos asociados a latencia también fueron encontrados. El modelo de infección simula adecuadamente el proceso de dispersión del HSV1 y puede ser usado para el estudio de la patogénesis por herpes después de la infección primaria en la mucosa oral (AU)

Diagnóstico diferencial de dengue y chikungunya en pacientes pediátricos / Dengue and Chikungunya differential diagnosis in pediatric patients

Introducción. Las infecciones por el virus del dengue y del chikungunya presentan síntomas clínicos similares, lo cual dificulta el diagnóstico clínico. Además, son transmitidas por los mismos vectores, por lo que en una región puede haber circulación e infección simultánea con los dos virus. Los resultados de cada enfermedad, no obstante, son diferentes: la fiebre del chikungunya rara vez es fatal, pero puede dejar secuelas de tipo articular y neurológico, en tanto que el dengue es potencialmente fatal. De ahí la importancia de un diagnóstico preciso y oportuno. Objetivo. Comparar el diagnóstico presuntivo basado en los hallazgos clínicos con el diagnóstico diferencial hecho mediante pruebas de laboratorio. Materiales y métodos. Se utilizaron pruebas virológicas y serológicas específicas para dengue y chikungunya en ocho muestras de sangre de pacientes pediátricos con síndrome febril. Se empleó la reacción en cadena de la polimerasa con transcriptasa inversa para detectar los virus del dengue y del chikungunya y el método de ELISA basado en la captura de IgM para confirmar los casos de dengue. Resultados. Con base en los hallazgos clínicos, dos pacientes se clasificaron como casos probables de dengue o chikungunya, dos como casos probables de chikungunya y en cuatro no hubo diagnóstico presuntivo de infección viral. Las pruebas de laboratorio confirmaron la infección por el virus del dengue en dos pacientes, por el virus del chikungunya en otros dos e infección simultánea de dengue y chikungunya en los cuatro restantes. Conclusión. Los hallazgos clínicos no fueron suficientes para hacer un diagnóstico en pacientes pediátricos con síndrome febril, por lo cual se requirieron pruebas específicas de laboratorio para establecer con precisión el agente etiológico causante de la enfermedad.

Introduction: Dengue and Chikungunya infections have similar clinical symptoms, which makes their clinical diagnosis complex. Moreover, both are transmitted by the same mosquito vectors, which results in virus co-circulation and co-infection. However, the outcome of these diseases differs: Chikungunya fever is rarely fatal but can have permanent and severe rheumatic and neurological sequelae, whereas dengue disease is potentially fatal. Thus, accurate diagnosis is critical. Objective: To compare presumptive diagnoses based on clinical findings with the differential diagnoses based on specific laboratory tests for each virus. Materials and methods: We performed specific virological and serological tests for both dengue and Chikungunya infections on eight acute-phase blood samples collected from pediatric patients with febrile syndrome. We used RT-PCR to detect dengue and Chikungunya virus, and IgM-capture ELISA to confirm infection by dengue virus. Results: Based on clinical findings, two patients were diagnosed as probable cases of dengue or Chikungunya, and two were diagnosed as probable cases of chikungunya. Four had no presumptive diagnosis of viral infection. Laboratory tests confirmed dengue infection in two patients, Chikungunya infection in two patients, and co-infection by the two viruses in the other four patients. Conclusion: Clinical findings were not sufficient to make a diagnosis in pediatric patients with febrile syndrome; specific laboratory tests were required to establish the etiologic agent of the disease.

La infección con el virus del dengue induce apoptosis en células del neuroblastoma humano SH-SY5Y / Dengue virus induces apoptosis in SH-SY5Y human neuroblastoma cells

Introducción. El dengue es una enfermedad humana producida por el virus del mismo nombre, que se transmite por la picadura de mosquitos del género Aedes . La infección tiene una amplia gama de presentaciones clínicas que van desde la ausencia de síntomas hasta los casos fatales y afecta principalmente a la población pediátrica. Según la nueva clasificación de la enfermedad, las manifestaciones neurológicas se consideran un criterio para el diagnóstico del dengue grave. Objetivo. Evaluar los posibles mecanismos involucrados en la aparición de los signos neurológicos en una línea celular de neuronas humanas, como modelo de infección con el virus del dengue del serotipo 2 (DENV-2). Materiales y métodos. Se evaluó la sensibilidad y la permisividad de la línea celular SH-SY5Y a la infección por el DENV-2; se encontró que la proporción entre infección y producción viral era similar a las de las células de primates usadas como control positivo de la infección. Resultados. La infección indujo un efecto citopático en la línea celular de neuroblastoma caracterizado por un proceso de muerte apoptótica, con aumento en la proporción de células positivas al emplear los métodos de anexina V y TUNEL. Se encontró una regulación positiva del factor de necrosis tumoral alfa (TNF-α), y el tratamiento con un anticuerpo anti-TNF-α aumentó ligeramente la supervivencia de las células infectadas. La adición de TNF-α exógeno a los cultivos infectados potenció la muerte celular. Conclusión. Estos resultados sugieren, en su conjunto, que la regulación positiva del TNF-α podría hacer parte del proceso que induce daño y muerte celular durante el desarrollo de la encefalitis por dengue.

Introduction: Dengue is a human disease caused by a virus with the same name, which is transmitted by the bite of Aedes mosquitoes. The infection has a wide range of clinical presentations ranging from asymptomatic to fatal cases, with the pediatric population being the most susceptible. According to the new classification of the disease, the neurological manifestations are considered a criterion for the diagnosis of severe dengue. Objective: To evaluate the possible mechanisms involved in the onset of neurological signs in a cell line of human neurons as a model of infection with dengue virus type 2 (DENV-2). Materials and methods: Susceptibility and permissiveness of the SH-SY5Y line to infection by DENV-2 was analyzed, showing that the proportions of viral infection and production are similar to those of primate cells used as positive control for infection. Results: Infection induced a cytopathic effect on the neuroblastoma line characterized by apoptotic cell death process, increasing the proportion of annexin V and TUNEL positive cells and an upregulation of TNF- α . Treatment with anti-TNF- α antibody increased slightly cell survival of infected cells. The addition of exogenous TNF- α to the infected cultures enhanced cell death. Conclusion: These results as a whole suggest that the upregulation of TNF- α could be part of the process that induces cell damage and death in cases of dengue encephalitis.

Descarga de HSV-1, HSV-2, CMV y EBV en la saliva de receptores de trasplante de precursores hematopoyéticos de la Fundación HOMI - Hospital de la Misericordia, Bogotá, DC / Shedding of HSV-1, HSV-2, CMV, and EBV in the saliva of hematopoietic stem cell transplant recipients at Fundación HOMI - Hospital de la Misericordia, Bogotá, DC

Introducción. El trasplante de precursores hematopoyéticos es una alternativa en el tratamiento de diversas condiciones en la población pediátrica. La intensidad del acondicionamiento para el trasplante predispone al desarrollo de complicaciones en los receptores. Las infecciones por el virus herpes simple 1 (HSV-1), el virus herpes simple 2 (HSV-2), el citomegalovirus (CMV) humano y el virus de Epstein-Barr (EBV) son una causa importante de morbimortalidad en estos pacientes. La reactivación de infecciones latentes puede producir descargas virales asintomáticas detectables en la saliva, lo cual ayuda a determinar el comportamiento de dichas infecciones en pacientes con trasplante y a establecer el diagnóstico temprano de la reactivación. Objetivo. Evaluar el comportamiento de la descarga viral de HSV-1, HSV-2, CMV y EBV en la saliva de pacientes hospitalizados en la Unidad de Trasplante de la Fundación HOMI - Hospital de la Misericordia, entre enero y noviembre de 2012. Materiales y métodos. Se evaluaron muestras de saliva de 17 receptores de trasplante. La presencia de ADN de HSV-1, HSV-2, CMV y EBV en las muestras de saliva se detectó mediante reacción en cadena de la polimerasa convencional. Resultados. Se detectó el ADN del HSV-2 en la saliva de cuatro pacientes, del CMV en la de cuatro y del EBV en la de nueve, lo cual se asoció con leucopenia. Cuatro de los 17 pacientes presentaron cargas simultáneas de CMV y EBV. No se detectó el ADN del HSV-1. Conclusiones: Se demostró una descarga asintomática de HSV-2, CMV y EBV asociada a leucopenia en la saliva de los pacientes.

Introduction: Hematopoietic stem cell transplantation in pediatric patients is an alternative treatment for different diseases. The conditioning regimen for transplant predisposes recipients to the development of infections. Viral infections by herpes simplex virus 1 (HSV-1), herpes simplex virus 2 (HSV-2), human cytomegalovirus (CMV), and Epstein-Barr virus (EBV), are the most common, and the leading cause of morbidity and mortality among these patients. These viruses lie dormant in various cell types and the reactivation of latent infections may lead to asymptomatic viral shedding in saliva. The detection of these viruses in secretions may contribute to understand the behavioral dynamics of these viral infections in transplanted patients, and to the early diagnosis of reactivation. Objective: To assess HSV-1, HSV-2, CMV and EBV viral shedding in the saliva of patients admitted for hematopoietic stem cell transplantation at Fundación HOMI - Hospital de la Misericordia between January and November of 2012. Materials and methods: We evaluated stimulated saliva samples of 17 hematopoietic stem cell transplantation recipients weekly. We performed DNA extraction from saliva, and we evaluated the presence of DNA for HSV-1, HSV-2, CMV, and EBV by PCR. Results: While we detected HSV-2 and CMV DNA in the saliva of four patients, EBV DNA was detected in nine patients with leukopenia. In contrast, we did not detect HSV-1 DNA in saliva. Additionally, four out of the 17 patients showed a simultaneous shedding of CMV and EBV. Conclusions: By conventional PCR, we demonstrated asymptomatic HSV-2, CMV, and EBV viral shedding in saliva, associated with leukopenia.

Detection of all four dengue serotypes in Aedes aegypti female mosquitoes collected in a rural area in Colombia

The Aedes aegypti vector for dengue virus (DENV) has been reported in urban and periurban areas. The information about DENV circulation in mosquitoes in Colombian rural areas is limited, so we aimed to evaluate the presence of DENV in Ae. aegypti females caught in rural locations of two Colombian municipalities, Anapoima and La Mesa. Mosquitoes from 497 rural households in 44 different rural settlements were collected. Pools of about 20 Ae. aegypti females were processed for DENV serotype detection. DENV in mosquitoes was detected in 74% of the analysed settlements with a pool positivity rate of 62%. The estimated individual mosquito infection rate was 4.12% and the minimum infection rate was 33.3/1,000 mosquitoes. All four serotypes were detected; the most frequent being DENV-2 (50%) and DENV-1 (35%). Two-three serotypes were detected simultaneously in separate pools. This is the first report on the co-occurrence of natural DENV infection of mosquitoes in Colombian rural areas. The findings are important for understanding dengue transmission and planning control strategies. A potential latent virus reservoir in rural areas could spill over to urban areas during population movements. Detecting DENV in wild-caught adult mosquitoes should be included in the development of dengue epidemic forecasting models.

Significados e imaginarios de las mentiras piadosas en estudiantes universitarios / Meanings and imaginaries about white lies in university students

Esta experiencia investigativa tuvo como propósito poder comprender los imaginarios que permiten que se mantengan las mentiras piadosas en algunos estudiantes de educación superior, para determinar las simbologías y las creencias que se desarrollan en el proceso de interacción frente a estas. Se circunscribe bajo un paradigma cualitativo siguiendo el método del interaccionismo simbólico. Se llevó a cabo en una institución de educación superior (Bogotá) mediante la conformación de grupos de discusión con la participación de seis estudiantes de dos facultades distintas realizados en el primer semestre del año 2016. A partir de la sistematización de los relatos surgieron como categorías centrales los significados y las creencias de las mentiras, la intención y las consecuencias de estas. Se estableció como conclusiones que la moralidad de las personas influye en la toma de decisión entre decir una mentira o no. Esta puede tener una connotación negativa si hace daño a otros o si genera desconfianza en las relaciones o, ser benevolente si no busca lastimar a alguien, además, puede ser entendida como necesaria. Así mismo, la religión parece ser un factor que juzga el hecho de la mentira dependiendo su intención. Por otro lado, la aceptación cultural es un componente predominante en el manteniendo de las mentiras. Se concluyó que a pesar de que las mentiras son un hecho constante en el diario vivir de las personas, no es muy cuestionable en el ámbito investigativo. Finalmente, dada la variabilidad de terminología asignada blancas, dulces, piadosas), la connotación que se le establece es menos negativa o dañina.

This investigative experience had as purpose to understand the imaginaries that can keep the white lies in some students in higher education, to determine the symbologies and beliefs that are developed in the process of interaction. Is it confined under a qualitative paradigm, following the method of symbolic interactionism. It was realized at an institution of higher education (Bogota) through the conformation of discussion groups with the participation of six students from two different faculties in the first half of the year 2016. the systematization of the stories have emerged as central categories: meanings and beliefs of lies, the intention and the consequences of these. It was established as the conclusions that the morality of individuals influences decision making between tell a lie or not. This can have a negative connotation if it harms others or if it generates distrust in relations or, be benevolent if you are not looking to hurt someone, it can also be understood as necessary. Likewise, religion seems to be a factor that judges the fact lie depending on its intention. On the other hand, cultural acceptance is a predominant factor in the keeping of the lies. It was concluded that while lies are a constant in the daily lives of people fact, it is not very questionable. Finally, despite the variability of assigned terminology, the connotation that takes is less negative or harmful.

Alta correlación en la detección de anticuerpos y antígenos de virus del dengue en muestras de suero y plasma / High correlation in dengue antibodies and antigen detection using serum or plasma samples

Introducción. El diagnóstico adecuado de dengue por laboratorio es importante para la atención, así como para el control de brotes y epidemias. Hasta el momento, las pruebas ELISA para diagnóstico serológico de la infección se encuentran validadas en muestras de suero; sin embargo, en algunas ocasiones la cantidad o calidad de la muestra es inadecuada, o solo se tiene acceso a sangre anticoagulada tomada para el análisis de los parámetros hematológicos en el hemograma. Objetivo. Evaluar el desempeño de cuatro pruebas ELISA en muestras de suero y plasma de casos sospechosos de dengue. Materiales y métodos. Se procesaron 42 muestras -21 de suero y 21 de plasma- por las técnicas de ELISA de captura para IgM, ELISA de captura para IgG, ELISA indirecta para IgG y ELISA para la detección del antígeno viral NS1. Resultados. El porcentaje de muestras positivas encontrado fue IgM 33.3%, IgG Captura 33.3%, IgG Indirecta 90.5%, NS1 23.8%. El 42.9% de las muestras fueron positivas por RT-PCR (n=9). Todas las pruebas se comportaron igual tanto en sueros como plasmas (coeficiente Kappa 1.0). Conclusión. Los resultados obtenidos muestran una alta concordancia entre las mediciones realizadas en suero y en plasma, lo cual sugiere que la muestra de plasma puede utilizarse para el diagnóstico y la confirmación de los casos de dengue.

Introduction. Appropriate dengue laboratory diagnosis is an important tool to manage the disease, as well to control possible outbreaks. Currently, ELISA dengue serological tests are validated to use with serum, however sometimes samples quality or quantity is inappropriate or there is only availability of anti-coagulated blood samples which have been used in total blood tests -haemogram-. Objective. To assess the performance of four dengue ELISA tests in serum or plasma samples obtained from presumptive dengue cases. Methodology. Forty two samples, 21 of serum and plasma each, were processed to dengue Capture IgM ultramicro-ELISA, Capture IgG ELISA, Indirect IgG ELISA and NS1 antigen ELISA. Nine out of 21 patients were diagnosed as dengue cases following the diagnostic algorithm. Results. The percentage of positive samples found was Capture IgM 33.3%, Capture IgG 33.3%, Indirect IgG 90.5% and NS1 dengue antigen 23.8%. Comparing the results between all ELISA tests it can be said that they had similar performances both in serum and plasma, the Kappa coefficient obtained was 1.0. Conclusions. These results show a high concordance between the measurements carried out in serum and plasma, which leads to suggest the latter may be used as a tool in the diagnosis and confirmation of dengue cases.

Aislamiento de metapneumovirus humano (HMPV) a partir de muestras clínicas / Human metapneumovirus isolation using clinical respiratory samples

Objetivo: El objetivo de este trabajo fue establecer una metodología para el aislamiento de una cepa de hMPV a partir de hisopados nasales provenientes de pacientes con sintomatología de enfermedad respiratoria aguda. Materiales y métodos: A partir de 12 muestras positivas por fluorescencia para hMPV, se hizo la inoculación en células LLCMK2 (epiteliales de riñón de mono Rhesus) con un medio de mantenimiento que contenía tripsina como proteasa. Se evaluó el efecto citopático diario por 10 días y se tomaron células infectadas que se utilizaron para la prueba de fluorescencia y para confirmar la infección. Se utilizó RT-PCR para corroborar la presencia del virus. Resultados: En 8 de las 12 muestras procesadas, se logró aislar el hMPV, confirmándose la infección por fluorescencia y RT-PCR. Conclusiones: A pesar de ser un virus de crecimiento lento y difícil de aislar según los reportes, en este trabajo se logró aislar el hMPV a partir de muestras clínicas frescas, lo cual resulta de gran utilidad en futuros estudios sobre la patogénesis de la infección respiratoria.

Objective: The aim of this work was to establish a laboratory protocol to isolate human metapneumovirus (hMPV) using as a source confirmed respiratory secretion samples from symptomatic patients. Methods: Twelve respiratory secretion samples confirmed for hMPV by immunofluorescence were inoculated on LLCMK2 primate cells using trypsin to improve the virus binding. The cytopathic effect was evaluated during 10 days, then they were stained with an hMPV specific antibody and culture supernatants were used to detect viral RNA by RT-PCR. Results: We isolated hMPV in 8 out of 12 samples. Monkey cells were susceptible to infection and showed viral replication in both immunocytochemistry and molecular tests and even syncytia formation. Conclusion: Despite the hMPV has low replication rates in culture, causing difficulties to isolate it, in this work we accomplish the viral isolation in eight samples that had been previously confirmed containing hMPV. These clinical isolates are a useful tool to study the respiratory infection pathogenesis.